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三聚氰胺 ELISA检测试剂盒说明书

发布时间:2017-05-31 22:50:45 分类:行业新闻 来源: 点击:次

三聚氰胺 ELISA检测试剂盒说明书 三聚氰胺 ELISA检测试剂盒说明书   1.概述  此试剂盒的原理是酶联免疫测定法,这个试剂盒可用于1切样品中3聚氰胺的定性或定量检测。如果需要进1步测定可以利用HPLC,GC/MS技术。  2.安全指点  试剂盒标准中含有少许的3聚氰胺,另外,底物溶液中含有4甲基联苯胺,终止液里含有稀释的盐酸。尽可能避免不要和这些试剂接触,如果这些试剂接触到皮肤请马上用水冲洗。  3.存储和稳定性  试剂盒应在4–8℃保存,在使用前试剂盒内的所有试剂都要回温到室温(20⑵5℃)在有效期内试剂可以1直使用  4.原理  酶联免疫吸附测定法定量测定3聚氰胺残留。将标准、样品提取物和3聚氰胺酶标记物加入到已包被有3聚氰胺抗体的微孔中开始反应。在30分钟的孵育进程中,样品萃取物中的3聚氰胺与3聚氰胺酶标记物竞争结合微孔中的3聚氰胺抗体,孵育30分钟后洗掉微

  1.概述

  此试剂盒的原理是酶联免疫电子力学实验机测定法,这个试剂盒可用于1切样品中3聚氰胺的定性或定量检测。如果需要进1步测定可以利用HPLC,GC/MS技术。

  2.安全指点

  试剂盒标准中含有少许的3聚氰胺,另外,底物溶液中含有4甲基联苯胺,终止液里含有稀释的盐酸。尽可能避免不要和这些试剂接触,如果这些试剂接触到皮肤请马上用水冲洗。

  3.存储和稳定性

  试剂盒应在载带剥离实验机4–8℃保存,在使用前试剂盒内的所有试剂都要回温到室温(20⑵5℃)在有效期内试剂可以1直使用

  4。原理

  酶联免疫吸附测定法定1t弹簧疲劳实验机量测定3聚氰胺残留。将标准、样品提取物和3聚氰胺酶标记物加入到已包被有3聚氰胺抗体的微孔中开始反应。在30分钟的孵育进程中,样品萃取物中的3聚氰胺与3聚氰胺酶标记物竞争结合微孔中的3聚氰胺抗体,孵育30分钟后洗掉微孔中所有无结合的3聚氰胺及纺织拉力实验机3聚氰胺酶标记物。在用稀释的洗液清洗结束后,每孔中加入清澈螺丝扭力实验机的底物溶液,结合的酶标记物将无色的底物转化为蓝色的物资。孵育20分钟后停止此反应,根据各孔色彩深浅进行数据读取。根据标准的色彩得出样品中3聚氰胺的的浓度值。

  5.局限性

  我们已对可能出现在检测样品中的很多有机和无机物做了检测,发现它们不和这个试剂盒产生交叉反应。但是在样品中也有1些易变质的化合物,它们通过基质影响来干扰测定,如含脂肪的食品,它们在测胶粘带持粘性实验机定前要通过稀释来消除1些基质影响。在使用的进程中出现失误也会影响结果,例如试剂盒存储的条件、吸取液体的程序、吸取液体的不准确、在产生免疫和底物反应的进程中孵育时间不准确。

  6.工作数据

  敏感性:3聚氰胺检测限10μg/L,B/B0为50%时的值为150 μg/L,测定结果在标准曲线的中间是最精确的。

  重复性:

  标准的变异系数(CVs) <10%;样品的变异系数(CVs)<15%.

  特异性:

  A 试剂盒组成

  1、真空包装微孔板(8×12条),包被有3聚氰胺多克隆抗体

  2、6瓶3聚氰胺标准液,浓度分别为0、20、50、100、200、500ng/mL(ppb)

  3、1瓶7mL 3聚氰胺酶标记物

  4、5×浓缩洗液 100ml 荷重曲线实验机;使用前需要使用蒸馏水以1:5的比例稀释

  5、1瓶14mL底物(TMB)

  6、1 瓶14mL终止液。(注意:盐酸,勿接触皮肤!)。

  B 测试前准备

  微量移液器" href="http://www.18show.cn/product/detail/12645637.html" target="_blank">微量移液器和吸头是必须使用的,推荐使用排枪,在做同1次测试时要使用同1个盒子里的试剂和标准。

  1、使用前将所有的试剂拿到室温交直流高压漏电起痕实验机(19℃⑵5℃)。

  2、从铝箔袋中拿出要求数量的微孔条,放入干燥剂并重新封好袋子以避免微孔条受潮。置于4⑻℃保存。

  3、标准液,酶结合物,底物,终止液不用稀释直接使用。

  4、洗液在使用前要以1:5的比例稀释后使用(比如:10ml洗液+40ml的蒸馏水)。

  5、由于终止液中包括盐酸拿的时候要谨慎。

  C。 步骤

  1、在对应的微孔中加入100 μL 标准或样品。最好做重复。

  2、用排枪在每一个孔中都加入50μL漆包线针孔实验机酶标记物、然后用纸箱包行走实验机片盖住微孔,轻轻震荡微孔板30秒使孔中的液体混匀。

  3、在室温下孵育30分。

  4、将孔里的液体倒入适合的容器中,每一个微孔最少加入250μL、1×洗液,然后弃掉洗液到适合的容器中,重复洗3次。在1层厚的吸水纸上拍板,去掉残留的洗液。定向跌落实验机

  5、使用排枪在每一个孔中加入100μL底物显色液,在室温孵育20分。尽可能使其不见光。

  6、每孔加入100μL终止液,板中色彩将会由蓝色变成棕黄色。

  7、450nm 下读取每一个孔的吸光度值(OD)。

  D. 结果评估

  可以利用商业ELISA软件程序比如Logit/Log or 4-Parameter来评价ELISA结果。也能够通过计算每一个标准的%B/B0值,以%B/B0为y轴、3聚氰胺浓度为x轴作1标准曲线。样品浓度可以通过标准曲线来计算。当样品中的3聚氰胺浓度高于标准5(500μg/L)时,需要稀释后重新再测定来取得更精确的结果。

  半定量结果的判定,可根据样品的吸光度值与标准的吸光度值来判定,样品的吸光水泥恒应力压力实验机度值低于某个标准的吸光度值,则说明样品的3聚氰胺含量大于此标准的浓度,样品的吸光度值高于某个标准的吸光度值,则说明样品的3聚氰胺含量小于此标准的浓度。

  E。还需装备

  1、50μL ~200μL 单道或多道移液器和吸头

  2、微孔板洗涤机

  3、金刚石冲击实验机振荡器

  4导线拉断力试负载燃烧实验机验机、蒸馏水或去离子水

  5、吸水纸

  6、离心机'>离心机

  7、450nm 滤光片的酶标仪

三聚氰胺 ELISA检测试剂盒说明书
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